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產品描述

支原體污染是細胞培養領域的一個普遍性問題，實驗室細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。支原體直徑約為0.1-0.3μm，且具有變形能力，可透過常見的過濾頭（0.22-0.45 μm），因此常規的過濾除菌的方法不能將其去除，細胞常用的抗生素（青霉素、鏈霉素）也對支原體無效。

支原體可通過細胞系之間交叉污染，操作人員的口腔、皮膚造成污染，或者血清等添加物而帶入污染。支原體無法通過常規的光學顯微鏡觀察到，不會引起培養基混濁，因此細胞被支原體污染一般難以察覺。

使用熒光染料進行DNA熒光染色，用支原體rRNA特異性的探針進行雜交，ELIAS檢測，PCR等支原體檢測方法中，PCR是簡便靈敏的支原體檢測方法。

本產品通過PCR方法檢測細胞培養中的支原體，所用引物根據支原體16S-23S rRNA 序列保守區域設計，特異性擴增支原體DNA，檢出靈敏度與特異性均較高。PCR 擴增及電泳分析只需數個小時，操作方便簡單。

產品組分

使用方法

細胞培養3-6天后，直接取其上清液進行PCR檢測。為排除細胞培養基中蛋白抑制PCR反應，模板體積不超過PCR反應體系的1/20。根據PCR產物電泳的結果來判斷是否有支原體污染。

1. 充分溶解PCR mix  按照如下表格配置PCR反應液：

        2. PCR反應條件： 

反應結束后，取10μL的PCR反應液（不需要加loading buffer）直接進行1-1.5%瓊脂糖凝膠電泳，確認PCR擴增產物。

注意事項

1） 使用本試劑前請仔細閱讀說明書；

2） 規范操作，包括反應體系的配制、樣本處理及加樣等；

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴口罩及一次性手套操作；

4） 本產品僅供研究使用，不得用于診斷或治療。